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说一说:干货!不同类型细胞的检测适用不同的染色方法,总有一款适合你!

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  • TA的每日心情
    奋斗
    2023-7-4 17:12
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    [LV.6]常住居民II

    发表于 2023-5-3 21:29:12 | 显示全部楼层 |阅读模式

    在细胞验中,细胞浓度、活率的检测是比较基础的一步,不同类型的细胞适用不同的染色方法。除了先天优势,[url]https://www.countstar.cn/细胞计数仪[/url]本身的产品属性也极为高端,在市场竞争中才能保持不败。[align=center]https://www.countstar.cn/uploads/image/20220830/1661833588.png[/align]


    比较常见的计数方法是台盼蓝染色原理,这种跨膜染料通过观察活死细胞形态来判断细胞活率,中心透亮未着色的为活细胞,被着色呈现心的为死细胞。近年来随着细胞治疗行业的进步,台盼蓝染色原理已经不能满足复杂的细胞样品的计数,比如原代细胞中的碎片、PBMC中残留的红细胞血小板等杂质碎片、培养后期的细胞,尤其在干细胞、CAR-T、NK等细胞治疗领域台盼蓝计数方法的缺陷尤为突出。






    随之衍生出的AOPI荧光计数方法(前几期有普及过),采用核酸特异性标记原理,AO(吖啶橙,小分子染料,488激发,525发)标记细胞核酸发绿色荧光,PI(碘化丙啶,大分子染料,535激发,600发)标记死细胞核酸发红色荧光,根据活死细胞荧光不同直接排除杂质碎片的干扰,弥补了台盼蓝的不足。AOPI荧光计数方法在干细胞、CAR-T、NK等细胞治疗领域广受科研工作者的喜爱。






    针对常规传代培养的细胞和比较复杂的细胞都有了相应的计数方法,帮助我们准确分析细胞的浓度、活率、平均直径等等,还有一类细胞是需要借助纸片微载体培养的,这类细胞的生长成球状,很难现在线计数,需要借助专门的裂解液,使细胞裂解后得到裸核,通过检测裸核现细胞浓度的检测,但是这种裂解液对台盼蓝和荧光试剂均有影响,会使台盼蓝团成絮状物,使AOPI的荧光发生猝灭,这种细胞的裸核计数用比较经典的台盼蓝和AOPI荧光方法均法现。






    面对这种细胞我们R除了台盼蓝活率计数、AOPI荧光计数法,还有第种计数方法,细胞计数—明场计数法,这种方法针对只需要检测细胞的生长浓度,不需要检测活率的验,对于上述提到的纸片微载体培养后裂解的细胞,不需要染色液直接细胞样品上样即可现细胞浓度计数。





    不同的细胞类型有不同的检测方法,我们CR荧光细胞分析仪同时提供明场细胞计数、台盼蓝活率计数、AOPI荧光法计数这种方法,配备CCD高清摄像头,获取细胞真的浓度,满足细胞验检测需求。
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