聊一聊：细胞计数系列--DC细胞

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树突状细胞(dendritic cell, DC)，是由美国科学家Steinman 和Cohn 1973年在小鼠脾脏中发现的一种细胞，因其细胞膜伸出许多类似于神经细胞的树突，故而得。树突状细胞是目前所知的功能比较强的抗原提呈细胞，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原；未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。长期以来新闻动态就有着不凡的发展速度，相信未来也是一如既往，势如破竹。Countstar基于全球研发、全球销售、中国生产的经营理念，艾力特生物科技（上海）有限公司已在美国设立分公司，在欧洲设立办事处。https://www.countstar.cn/news.php[align=center]https://www.countstar.cn/uploads/image/20180419/1524107659.jpg[/align]




图一 DC细胞示意图（图片来源于网络）



：DC细胞来源


人体树突状细胞起源于造血干细胞，主要来源有两条途径：

① 髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC(MDC)，也称DC1，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞。

② 来源于淋巴样干细胞，称为淋巴样DC(LDC)或浆细胞样DC（piX)，即DC2，与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞。

树突状细胞尽管数量不足外周血单核细胞的1%，但表面具有丰富的抗原递呈分?(MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)、共刺激因?(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40、CD40L等)和粘附因?(ICAM-1、ICAM-2、ICAM-3、LFA-1、LFA-3等)，是功能强?的专职抗原递呈细胞(APC）。


图二 DC细胞的来源和分布（图片来源于网络）


：DC细胞生物学功能


一、抗原提呈

①强的吞饮作用；

②受体介导的内吞(FcR/CR/ 甘露糖受体）；

③吞噬作用；

④表面捕获(FDC)FcR和C3bR。

二、免疫调节

①激活初始T细胞，启动免疫应答；

②分泌细胞因子，调节免疫细胞分化发育；

③分泌趋化性细胞因子，趋化T/B细胞；

④利用未成熟DC诱导免疫耐受。



：DC细胞的免疫效应


（1）DC细胞免疫效应机理：

DC细胞是已知体内功能比较强、惟?能活化静息T细胞的专职抗原提呈细胞，是启动、调控和维持免疫应答的中心环节。通过大量体外活化培养负载肿瘤抗原的DC细胞，当细胞数量达到一定数量后回输给病?，可诱导机体产生强烈的抗肿瘤免疫反应。



（2）DC细胞免疫反应的作用机制（以肿瘤治疗为例）：

在肿瘤免疫中，DC不能直接杀伤肿瘤细胞，但能通过识别肿瘤细胞特异性抗原，将其信号呈递给具杀伤效应的T细胞来达到监测、杀灭肿瘤的功能。其主要使通过以下4种机制现肿瘤治疗：

①诱导产生大量效应T细胞；

②启动效应T细胞迁移至肿瘤部位；

③保持效应T细胞在肿瘤部位的长期存在；

④抑制肿瘤血管的生成。



(3)DC细胞刺激免疫反应的特点：

①DC细胞是?体内功能比较强的专职抗原递呈细胞，DC相当于信使，将抗原信息传递给T细胞，并具有活化T细胞的功能，很少量就可以激发强大的T细胞反应。

②可致敏辅助T细胞的多种细胞因子，显著刺激初始型T细胞增殖，以激活体内静止状态的初始型T细胞（而巨噬细胞、B细胞仅能刺激已活化的或记忆性T细胞）。

③帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫监视功能。机体的免疫系统具有完备的监视功能，但肿瘤细胞对机体的免疫系统有抵抗和抑制作用，使得免疫细胞不能识别和杀伤肿瘤细胞。在DC疫苗培养中用肿瘤抗原诱导DC使其致敏后，可将其抗原信息传递给T细胞，使T细胞重新识别和杀伤肿瘤细胞。



图 DC细胞免疫效应示意图（图片来源于网络）


：DC细胞的适应症及应用前景


DC是肿瘤细胞免疫治疗的重要成分。DC细胞在操作上具有很大的灵活性，包括DC细胞的来源、分离?法、抗原引入方法、延长存活时间、提高活性等各个方面都有许多不同的操作方法，每种方法都各有势，因此可以通过不同的化、组合来衍化出多种治疗方法，从而适应于不同条件的患者。大量研究显示DC细胞安全，易于操作，对于一系列类型的肿瘤均有免疫抑制作用，并在肿瘤的免疫治疗取得了令?鼓舞的初步结果。


（1）DC细胞适应症:

DC细胞治疗通过采用病人自体的单核细胞在体外培养诱导生成DC，然后通过生物技术手段负载相应的肿瘤抗原，制成负载肿瘤抗原的DC，再将这些DC细胞注入体内后刺激体内的肿瘤杀伤性淋巴细胞增值，发挥长期肿瘤监视作用和肿瘤杀伤作用，达到消灭肿瘤的目的。

DC细胞治疗适用于恶性黑色素瘤、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、各种肺癌、鼻咽癌、喉癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等。



(2)DC细胞研究应用前景

比较新研究显示DC细胞和CIK细胞共培养后，提高了细胞增值的速度和杀伤活性，且使其对肿瘤细胞的杀伤作用更具特异性。DC和CIK细胞对于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系统等及各系统肿瘤细胞均有杀伤作用。因此，DC和CIK细胞共培养技术将是研究DC细胞的热点方向。



：DC细胞制备过程中的检测与质控


在DC细胞制备的整个过程中，都需要对细胞进行浓度和活率检测。作为免疫细胞的一员，DC细胞兼具免疫细胞的特性，体积较小；且DC细胞形状不规则，若用明场计数的方法对DC细胞的浓度和活率进行检测，可能会受到样品中红细胞等核细胞以及细胞碎片和杂质的干扰；因此，我们建议使用荧光染色的方法进行DC细胞的计数。

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Countstar Rigel 全自动荧光细胞分析仪是一款基于图像法检测，配合多荧光通道，通过采集图像中的细胞信息，进行定量分析的智能系统。它将荧光显微成像与统计学群体分析结合于一身，既能提供细胞群的统计数据，又可以获得单个细胞的图像，从而提供细胞形态学信息，独特的图像采集同时产生明场以及荧光图像，使结果更为直观。它结合AO(吖啶橙)和PI(碘化吡啶)两种核酸染料，可以排除核细胞、杂质和碎片的干扰，从而得到准确的计数结果。

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